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TP de Biochimie

spec

Volumétrie

 

1) Demi-équations

 

acide oxalique : HOOC-COOH  ->  (-OOC-COO-)

acide acétique : CH3-COOH  ->  (CH3-COO-) + (H+)

hydroxyde de sodium : NaOH  ->  OH- + (H+) + (Na+)

2) Equation : aA + bB  ->  cC + dD

Ex:

HOOC-COOH + 2NaOH  ->  -OOC-COO- + 2H2O

CH3-COOH +NaOH  ->  CH3-COO- + H2O

3) A l'équivalence

n(A)/a = n(B)/b   Faire attention aux facteurs stœchiométriques !!!

Si n(A)=n(B) :

 

on sait que n(A)=m(A)/M(A) et n(B)= C(B).V(B) 

donc m(A)/M(A)=C(B).V(B)  d'où m(A)=C(B).V(B).M(A) 

or V(B)=Véq  donc  m(A)=C(B).Véq.M(A)

Si n(A)/a=n(B)/b

m(A)= (C(B).Véq.M(A).a)/b

4) Calcul de la masse à prélever avec Véq= 10mL ou 15mL

Si m > 0,1 g de précision de la balance alors on utilise la méthode des pesées successives.

Mode opératoire : 

Si m < 0,1 g de précision de la balance on va peser une masse plus grande (x2 ou x5 ou x10) et l'on dilue ensuite en fiole jaugée pour revenir à la concentration voulue, c'est la méthode des solutions titrées.

Mode opératoire si on pèse 2 fois plus et l'on dilue au 1/2 : 

Formules utiles :

n=C.V

n=m/M

Cmolaire = n/V = Cmassique/M

Cmassique = m/V = Cmolaire.M = m volumique/ %

m volumique = m/V

densité = m volumique /m volumique de l'eau

m volumique de l'eau = 1 000 g/L

Acceptabilité des résultats

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

Spectrophotométrie : gamme d'étalonnage

1) Vérifier si la solution étalon, la solution contrôle et les essais sont à diluer

2) Tableau de gamme

3) Définir les paramètres de régression linéaire

a=...

b=...

r^2 =....      avec r^2 > 0,9990 pour valider la régression et pouvoir exploiter les résultats, si r^2 < 0,9990 enlever un point de la gamme.

 

4) Calcul de la concentration

A= a.C+b ou A=a.Q+b

5) Acceptabilité + expression du résultat

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vol
ccm
enz
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